6月25日，国际生物学权威杂志Nucleic Acids Research在线发表了永利官网同济医学院060net永利吴曈勃教授和永利官网同济医学院附属协和医院洪嘉欣博士、黄永明博士等人最近的研究成果“PAM-free hairpin target binding activates trans-cleavage activity of Cas12a”。该研究发现了发夹结构的激活剂底物可以在无需PAM的辅助下特异性激活CRISPR-Cas12a，为Cas12a的活性调控提供新途径。
研究表明，双链DNA（dsDNA）作为Cas12a激活底物时，必须含有原间隔区邻近基序（PAM，5-TTTV-3），限制了底物的选择。免PAM激活底物的开发可拓宽Cas12a的应用范围，在分子诊断、生物传感器等其他相关领域具有重要意义。
吴曈勃团队报告了一种新型CRISPR-Cas12a激活底物，该底物为发夹结构，由环（任意序列）和茎（原间隔区dsDNA）组成。通过序列和结构分析，团队证明发夹结构的DNA底物无需PAM序列便可以激活Cas12a的反式切割活性，通过改变发夹位置、大小等可以调控Cas12a的活性。基于此，团队开发了由发夹结构DNA到dsDNA的变构策略，快速灵敏地检测非核酸靶标。该方法可有效避免背景泄漏和靶标丢失，无需复杂设计，实现了次氯酸和钙离子的灵敏检测。
2022级博士生李小龙为第一作者。
原文链接：https://academic.oup.com/nar/article/53/12/gkaf596/8173576
